När cellerna vi odlar i

cellfabrikär förorenade, de flesta av dem är svåra att hantera.Om de kontaminerade cellerna är värdefulla och svåra att få tag på igen, kan följande metoder användas för att ta bort dem.

1. Använd antibiotika

Antibiotika är effektivare för att döda bakteriercellfabriker.Kombinationsmedicin är effektivare än enbart medicin.Förebyggande medicinering är effektivare än medicinering efter kontaminering.Förebyggande medicinering använder i allmänhet ett dubbelt antibiotikum (penicillin 100u/mL plus streptomycin 100μg/mL).Efter kontaminering måste rengöringsmetoden vara 5 till 10 gånger större än den vanliga mängden.Läkemedlet ska användas i 24 till 48 timmar efter tillsatsen och sedan ersättas med den vanliga rutinen.Kulturvätska.Denna metod kan vara effektiv i de tidiga stadierna av kontaminering.Utöver penicillin och streptomycin kan antibiotikan som används även innefatta gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracyklin, nystatin etc. Vanligtvis används 400 till 800 μg/mL kanamycin eller 200 μg/mL tetracyklin.Mediet byts varannan till var tredje dag och förs vidare i 1 till 2 generationer för behandling.Under de senaste åren har det rapporterats att 4-fluoro, 2-hydroxikinolin (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilin derivat (Pleu-romutilin derivat, BM-Cyclin2: BM-1 och tetracyklin derivat (BM-2)) Antibiotika är effektivt för att döda mykoplasma när det används ensamt eller i kombination.Dessa tre antibiotika bereds alla till 250X koncentrerade lösningar i PBS och lagras vid -20°C för senare användning.Användningskoncentrationen Cip är 10 μg/mL, BM-1 är 10 μg/mL och BM-2 är 5μg/mL.Vid användning, aspirera först det kontaminerade odlingsmediet, tillsätt RPMI1640 odlingsmedium innehållande BM-1, aspirera sedan odlingsmediet efter 3 dagar, tillsätt RPMI1640 odlingsmedium innehållande BM-2 och odla i 4 dagar, och så vidare i 3 dagar i följd. .omgångar, tills det är bevisat med 33258 fluorescerande färgningsmikroskopi att mykoplasma har eliminerats, sedan tillsätts normalt odlingsmedium för odling och passage 3-4 gånger.

2. Värmebehandling

Inkubering av kontaminerad vävnadskultur vid 41°C i 18 timmar kan döda mykoplasma, men har negativa effekter på celler.Därför bör ett preliminärt test utföras före behandling för att undersöka uppvärmningstiden som kan döda mykoplasma i maximal utsträckning och ha minst inverkan på cellerna.Denna metod är ibland opålitlig.Om den behandlas med läkemedel först och sedan värms upp till 41°C blir effekten bättre.

3. Använd mykoplasmaspecifikt serum

Mykoplasmakontamination kan avlägsnas med 5 % kaninmykoplasma-immunserum (hemagglutinationstiter 1:320 eller högre).Eftersom den specifika antikroppen kan hämma tillväxten av mykoplasma, blir den negativ 11 dagar efter antiserumbehandling och förblir negativ 5 månader senare.är negativ.Denna metod är dock mer besvärlig och inte lika bekväm och ekonomisk som att använda antibiotika.

4. Andra metoder

Utöver de ovan nämnda metoderna för att avlägsna kontaminering, finns det också inokulering och steriliseringsmetoder hos djur, makrofagfagocytosmetoder, metoder för att tillsätta bromoracil till kontamineradekulturflaskoroch sedan bestråla dem med ljus, och filtreringsmetoder etc., men de är alla mer besvärliga och ineffektiva.När mykoplasmakontamination väl inträffar, såvida den inte är av särskilt viktigt värde, kasseras den i allmänhet och återodlas.

vänligen kontakta Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709